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Prima prova clonazione

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Re: Prima prova clonazione

Messaggio Da Fratecipolla il Dom 22 Apr 2018 - 13:54

Mah può succedere anche dopo qualche ora per precipitazione e coalescenza di particelle più piccole che prima erano invisibili in sospensione.

Comunque per togliere ogni dubbio meglio trasferire su spawn, o ancora meglio su agar Smile
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Re: Prima prova clonazione

Messaggio Da Marco100 il Dom 22 Apr 2018 - 13:58

Credo vada fatta anche un’ulteriore valutazione, è probabile che il miele da me usato abbia qualita nutritive diverse da quello acquistato al supermercato, e non di poco....
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Re: Prima prova clonazione

Messaggio Da Marco100 il Dom 22 Apr 2018 - 14:00

[Devi essere iscritto e connesso per vedere questo link] ha scritto:Mah può succedere anche dopo qualche ora per precipitazione e coalescenza di particelle più piccole che prima erano invisibili in sospensione.

Comunque per togliere ogni dubbio meglio trasferire su spawn, o ancora meglio su agar Smile
Per poterlo fare però deve crescere ancora sennò come faccio, con la siringa è dura arrivarci, forse.......
Ora che ci penso Andrea, come si fa a passare la LC su petri?
Se devi flambare l’ago non puoi passarne una goccia, se versi troppa soluzione allaghi la petri..... Non si scalda?


Ultima modifica di Marco100 il Dom 22 Apr 2018 - 20:15, modificato 3 volte
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Re: Prima prova clonazione

Messaggio Da Marco100 il Dom 22 Apr 2018 - 16:02

Sono da mio padre :-)
Questi stasera sono già nei barattoli![Devi essere iscritto e connesso per vedere questo link]
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Re: Prima prova clonazione

Messaggio Da MaX il Lun 23 Apr 2018 - 11:48

[Devi essere iscritto e connesso per vedere questa immagine]

Questa, come micelio, sta prendendo la via giusta, anche se nomn mi convincono quellie formazioni sparse ... incrociamo le dita!
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Re: Prima prova clonazione

Messaggio Da MaX il Lun 23 Apr 2018 - 11:51

[Devi essere iscritto e connesso per vedere questo link] ha scritto:Capisco perché [Devi essere iscritto e connesso per vedere questo link] consiglia lo sciroppo d’acero, questa è una delle due fatte mercoledì sera con agaricus, per il momento sono entrambe pulite....
[Devi essere iscritto e connesso per vedere questa immagine]
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Re: Prima prova clonazione

Messaggio Da MaX il Lun 23 Apr 2018 - 11:58

[Devi essere iscritto e connesso per vedere questo link] ha scritto:Sono da mio padre :-)
Questi stasera sono già nei barattoli![Devi essere iscritto e connesso per vedere questo link]
Very Happy W
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Re: Prima prova clonazione

Messaggio Da MaX il Lun 23 Apr 2018 - 12:05

[Devi essere iscritto e connesso per vedere questo link] ha scritto:
[Devi essere iscritto e connesso per vedere questo link] ha scritto:Mah può succedere anche dopo qualche ora per precipitazione e coalescenza di particelle più piccole che prima erano invisibili in sospensione.

Comunque per togliere ogni dubbio meglio trasferire su spawn, o ancora meglio su agar Smile
Per poterlo fare però deve crescere ancora sennò come faccio, con la siringa è dura arrivarci, forse.......
Ora che ci penso Andrea, come si fa a passare la LC su petri?
Se devi flambare l’ago non puoi passarne una goccia, se versi troppa soluzione allaghi la petri..... Non si scalda?
Devi comunque necessariamente flambare.
Prima prepari il materiale, guardando la siringa in controluce e tenendo l'ago verso l'alto fai uscire più soluzione possibile cercando di non espellere il micelio(assorbi il liquido con della carta assorbente tenuta con una mano sull'ago), poi metti in glove, flambi e trasferisci il minimo possibile in piastra. Wink
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Re: Prima prova clonazione

Messaggio Da Fratecipolla il Lun 23 Apr 2018 - 12:16

Non so quanto tu ti senta sicuro con la tua glove-box, ma in teoria potresti semplicemente aprire il barattolo, pescare quello che vuoi con le pinzette, e trasferire senza liquido appresso...
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Re: Prima prova clonazione

Messaggio Da Marco100 il Mar 24 Apr 2018 - 0:06

[Devi essere iscritto e connesso per vedere questo link] ha scritto:[Devi essere iscritto e connesso per vedere questa immagine]

Questa, come micelio, sta prendendo la via giusta, anche se nomn mi convincono quellie formazioni sparse ... incrociamo le dita!
Ho un barattolo dove il micelio sembra stia inglobando le formazioni, in quello sono molte ma il micelio sembra crescere...
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Re: Prima prova clonazione

Messaggio Da MaX il Mar 24 Apr 2018 - 0:11

Se continua a crescere bianco candido senza striature, sfumature o zonature marroni vuol dire che sta proseguendo bene!
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Re: Prima prova clonazione

Messaggio Da Marco100 il Mar 24 Apr 2018 - 0:18

[Devi essere iscritto e connesso per vedere questo link] ha scritto:Se continua a crescere bianco candido senza striature, sfumature o zonature marroni vuol dire che sta proseguendo bene!
Appena posso faccio una foto.....
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Re: Prima prova clonazione

Messaggio Da Marco100 il Mar 24 Apr 2018 - 0:19

[Devi essere iscritto e connesso per vedere questo link] ha scritto:
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[Devi essere iscritto e connesso per vedere questo link] ha scritto:Mah può succedere anche dopo qualche ora per precipitazione e coalescenza di particelle più piccole che prima erano invisibili in sospensione.

Comunque per togliere ogni dubbio meglio trasferire su spawn, o ancora meglio su agar Smile
Per poterlo fare però deve crescere ancora sennò come faccio, con la siringa è dura arrivarci, forse.......
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Se devi flambare l’ago non puoi passarne una goccia, se versi troppa soluzione allaghi la petri..... Non si scalda?
Devi comunque necessariamente flambare.
Prima prepari il materiale, guardando la siringa in controluce e tenendo l'ago verso l'alto fai uscire più soluzione possibile cercando di non espellere il micelio(assorbi il liquido con della carta assorbente tenuta con una mano sull'ago), poi metti in glove, flambi e trasferisci il minimo possibile in piastra. Wink

Bow down
Mediamente quanta soluzione si versa in una petri, 2/3 mm di spessore?
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Re: Prima prova clonazione

Messaggio Da Marco100 il Mar 24 Apr 2018 - 0:23

[Devi essere iscritto e connesso per vedere questo link] ha scritto:Se continua a crescere bianco candido senza striature, sfumature o zonature marroni vuol dire che sta proseguendo bene!
Le formazioni non sono bianche ma tendenti al marrone, poi guardo meglio il colore del micelio.....


Ultima modifica di Marco100 il Mar 24 Apr 2018 - 0:37, modificato 1 volta
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Re: Prima prova clonazione

Messaggio Da Marco100 il Mar 24 Apr 2018 - 0:27

[Devi essere iscritto e connesso per vedere questo link] ha scritto:Non so quanto tu ti senta sicuro con la tua glove-box, ma in teoria potresti semplicemente aprire il barattolo, pescare quello che vuoi con le pinzette, e trasferire senza liquido appresso...
Dovrei infilare tutte le pinze nel barattolo e prendere il frammento sul fondo.....? Don't know
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Re: Prima prova clonazione

Messaggio Da Fratecipolla il Mar 24 Apr 2018 - 12:17

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Dovrei infilare tutte le pinze nel barattolo e prendere il frammento sul fondo.....? Don't know

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Se sono ben sterilizzate e l'ambiente intorno pure, non c'è problema.
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Re: Prima prova clonazione

Messaggio Da MaX il Mar 24 Apr 2018 - 15:16

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Si trasferisce solo qualche goccia di coltura, possibilmente più micelio che soluzione.
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Re: Prima prova clonazione

Messaggio Da MaX il Mar 24 Apr 2018 - 15:19

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Anche questa è una tecnica, ma per chi inizia ora la sconsiglio, basta una piccola disattenzione e contamini tutto, soprattutto in glovebox. tongue
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Re: Prima prova clonazione

Messaggio Da Marco100 il Mar 24 Apr 2018 - 22:14

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Prima o poi mi farò coraggio! Bravo
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Re: Prima prova clonazione

Messaggio Da Marco100 il Mar 24 Apr 2018 - 22:16

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Per poterlo fare però deve crescere ancora sennò come faccio, con la siringa è dura arrivarci, forse.......
Ora che ci penso Andrea, come si fa a passare la LC su petri?
Se devi flambare l’ago non puoi passarne una goccia, se versi troppa soluzione allaghi la petri..... Non si scalda?
Devi comunque necessariamente flambare.
Prima prepari il materiale, guardando la siringa in controluce e tenendo l'ago verso l'alto fai uscire più soluzione possibile cercando di non espellere il micelio(assorbi il liquido con della carta assorbente tenuta con una mano sull'ago), poi metti in glove, flambi e trasferisci il minimo possibile in piastra. Wink

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Si trasferisce solo qualche goccia di coltura, possibilmente più micelio che soluzione.
Intendevo per la preparazione iniziale delle petri Max.....
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Re: Prima prova clonazione

Messaggio Da MaX il Mar 24 Apr 2018 - 22:24

Scusa non avevo inteso, visto che si parlava dei trasferimenti ... Embarassed

3/4 mm max
meglio se stai a 3 mm
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Re: Prima prova clonazione

Messaggio Da Marco100 il Mar 24 Apr 2018 - 22:28

[Devi essere iscritto e connesso per vedere questo link] ha scritto:Scusa non avevo inteso, visto che si parlava dei trasferimenti ... Embarassed

3/4 mm max
meglio se stai a 3 mm
Si poteva capire anche in quel senso!
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Re: Prima prova clonazione

Messaggio Da MaX il Mar 24 Apr 2018 - 22:30

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Re: Prima prova clonazione

Messaggio Da Marco100 il Mar 24 Apr 2018 - 23:19

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Dovrei infilare tutte le pinze nel barattolo e prendere il frammento sul fondo.....? Don't know

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Anche questa è una tecnica, ma per chi inizia ora la sconsiglio, basta una piccola disattenzione e contamini tutto, soprattutto in glovebox. tongue
Immaginavo che sarebbe stata questa la risposta di Max Rolling launghter
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Re: Prima prova clonazione

Messaggio Da MaX il Mar 24 Apr 2018 - 23:27

Sai com'è, Marco ... è un po' come giocare all'allegro chirurgo, oltre alla mano ferma ci vuole anche una buona dose di c..o!!

Ti sei distratto, Ahhhhggg e si accende il naso rosso!!!  Rolling launghter  Laughter

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